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標(biāo)題《布比-卡因調(diào)控LncRNA LBX2-AS1對(duì)宮頸癌細(xì)胞SiHa增殖及凋亡的影響》

摘要：目的:探討布比-卡因?qū)m頸癌細(xì)胞SiHa增殖、凋亡的影響及其對(duì)LncRNA LBX2-AS1的調(diào)控作用。方法:體外培養(yǎng)人宮頸癌細(xì)胞SiHa,分別加入不同劑量的布比-卡因處理細(xì)胞,分別將si-NC、si-LBX2-AS1轉(zhuǎn)染至SiHa細(xì)胞,分別將pcDNA、pcDNA-LBX2-AS1轉(zhuǎn)染至SiHa細(xì)胞后使用布比-卡因處理;采用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡率;采用qRT-PCR法檢測(cè)LBX2-AS1的表達(dá)量;Western blot法檢測(cè)Cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表達(dá)量。結(jié)果:布比-卡因可明顯降低光密度（OD）值、S期細(xì)胞比例、LBX2-AS1的表達(dá)水平及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期細(xì)胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;轉(zhuǎn)染si-LBX2-AS1可明顯降低OD值、S期細(xì)胞比例及pro-caspase3蛋白水平（P<0.05）,提高凋亡率、G0-G1期細(xì)胞比例及Cleaved-caspase3蛋白水平（P<0.05）;

產(chǎn)品使用說(shuō)明：

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan，在特定溶劑存在的情況下，可以被完-全溶解，然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定490nm波長(zhǎng)附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。

注意事項(xiàng)：

1.由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面，由于96孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā)，可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。

2.MTT溶液為黃色需避光保存，長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請(qǐng)勿使用。Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時(shí)可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。

3.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。